Tim-3抗体的生物学活性及应用研究

• 作者: 侯春梅 冯健男 沈倍奋 王仁喜 肖燕 肖鹤 蒋兴伟 郎小玲 郑明克 陈国江 韩根成 黎燕
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 生物学
• 关键词: Tim-3 抗体,单克隆 L3D U937细胞 炎性因子 脓毒症
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 617-620,625
• 页数: 5页
• 分类号: Q813.2
• 字数: 3586字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2014.08.012

摘要

目的：制备抗人Tim-3单抗并评价其生物学活性，为干预Tim-3表达失调引发的疾病提供实验基础。方法制备重组人Tim-3蛋白，常规方法免疫BALB/c小鼠，筛选出阳性克隆，并对其识别、中和活性进行体内外验证，探讨其作为免疫干预手段的可行性。结果①获得一株能够分泌具有较好结合活性的抗人Tim-3单克隆抗体细胞株（克隆号L3D），其分泌的免疫球蛋白亚型为IgG2a；②流式实验结果表明，该抗体能够结合人U937细胞上的Tim-3分子，且与小鼠RAW 264．7细胞上Tim-3有一定的交叉结合活性；③该抗体能够阻断Gal-9分子诱导的人THP1细胞凋亡，具有良好的体外中和活性；④体内注射L3D，显示该抗体能够显著加重脓毒血症模型小鼠病情，提高炎性因子的表达水平，显示出其良好的体内中和活性。结论成功制备一株分泌抗人Tim-3抗体的细胞株，其良好的结合及中和活性为基于Tim-3表达异常相关疾病的干预提供了实验基础。