河蚌提取物葡聚糖对软骨细胞Wnt通路的调控作用研究

• 作者: 丁道芳 庞坚 徐勤光 曹月龙 王学宗 詹红生 郑昱新 韦宋谱
• 来源期刊: 中国骨伤
• 关键词: 组织提取物 软骨细胞 葡聚糖类 基因表达调控
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 461-465
• 页数: 5页
• 字数: 3991字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-0034.2014.06.005

摘要

目的：探讨河蚌肉提取物葡聚糖HBP-A（anodonta glucan HBP-A）对体外软骨细胞Wnt通路的调控作用。方法：体外培养大鼠软骨细胞，添加IL-1β（10 ng/ml）诱导分化，分为空白组，IL-1β组，IL-1β＋IWP-2（5μM，Wnt通路抑制剂）组，IL-1β＋HBP-A（0．3 mg/ml）组，IL-1β＋IWP-2＋HBP-A共5组培养，提取各组细胞RNA和蛋白，采用Rt-PCR 检测各组细胞 Wnt-3a、β-catenin （24、48、72 h）及 MMP-13（72 h）的基因表达；采用 Western-blot 检测β-catenin、MMP-13、Sox-9和Coll-Ⅱ蛋白的表达水平（48 h）。结果：细胞经IL-1β诱导分化，Wnt-3a基因表达升高，β-catenin以及MMP-13基因和蛋白表达升高，Sox-9和Coll-Ⅱ蛋白表达下调。添加HBP-A干预可以抑制IL-1β诱导下软骨细胞Wnt-3a基因的高表达、β-catenin以及MMP-13基因和蛋白的高表达，上调Sox-9和Ⅱ型胶原蛋白的表达。IWP-2和HBP-A合用时，Wnt-3a、β-catenin基因以及β-catenin蛋白表达最低，Sox-9蛋白表达最高。结论：HBP-A可通过降低Wnt/β-catenin信号通路表达，延缓软骨细胞分化，并且可与Wnt抑制剂协同调节Wnt-3a、β-catenin和Sox-9因子的表达。