苯乙醇胺A人工抗原的制备与鉴定

• 作者: 侯玉泽 张改平 段萌琪 王方雨 王耀 胡骁飞 蔡齐超 邓瑞广
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 苯乙醇胺A 人工抗原 多抗血清 酶联免疫吸附法
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 150-155
• 页数: 6页
• 分类号: S859.84
• 字数: 3868字
• 语种: 中文

摘要

为合成苯乙醇胺A人工抗原,并制备出鼠源苯乙醇胺A多抗血清,采用琥珀酸酐法改造苯乙醇胺A,应用活化脂法(DCC)和碳二亚胺法(EDC)与载体蛋白相连,合成人工免疫原苯乙醇胺A-BSA和检测原苯乙醇胺A-OVA,并用紫外扫描光谱法、凝胶电泳法(SDS-PAGE)和酶联免疫吸附法(ELISA)鉴定偶联结果.结果显示,在紫外扫描光谱下,合成的免疫原在276 nm处出现最大吸收峰;SDS-PAGE电泳发现,免疫原出现明显的拖尾现象;按10 μg/只的剂量免疫小鼠,共免疫4次,每次间隔3周,最后1次免疫10 d后,断尾采血,经测定,得到的多抗血清的效价均达到1 ∶ 10 000,且1号小鼠多抗血清的敏感性最好,半数抑制浓度(IC50)为536.8 ng/mL,与其他药物的交叉反应率均小于0.5％,具有很好的特异性.成功合成了苯乙醇胺A人工抗原,并得到了敏感性高、特异性好的多抗血清.