RNA干扰沉默PID1基因肉兔模型的构建

• 作者: 张哲 徐正刚 房国锋 曾勇庆 杨云 杨伦 王守栋 陈伟
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 新西兰肉兔 PID1基因 RNA干扰 肌内脂肪
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 750-756
• 页数: 7页
• 分类号: S829.1|S813.3
• 字数: 4633字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2014.05.010

摘要

为进一步研究PID1基因的功能,本试验在前期构建并筛选得到的高效PID1 RNA干扰表达载体pG-PU6/GFP/Neo-PID1-2的基础上,利用精子介导法制备RNA干扰PID1转基因肉兔模型.对繁殖的F1代肉兔个体进行活体荧光检测、PCR、RT-PCR和Western blot检测,并对不同组别(阳性组、阴性组和空白对照组)体重达3.0 kg左右的F1代肉兔抽样屠宰进行肌内脂肪的测定.研究结果表明:外源基因和绿色荧光蛋白基因(GFP)在转基因兔后代中可成功表达,试验组得到F1代个体106只,其中阳性兔7只,转基因阳性率为6.60％.PID1基因RNAi阳性兔与阴性兔、空白对照兔相比,RT-PCR检测PID1基因mRNA表达量显著降低(P＜0.05),Westernblot测得PID1蛋白表达水平呈下降趋势,肌内脂肪的含量显著降低(P＜0.05);综上表明,PID1基因与肌内脂肪沉积密切相关.本研究从RNAi肉兔模型构建的角度进一步验证了PID1基因对肌内脂肪沉积影响的功能,也为下一步研究制备高肌内脂肪优质PID1转基因猪奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曾勇庆	山东农业大学动物科技学院	108	1583	23.0	36.0
2	陈伟	山东农业大学动物科技学院	61	761	15.0	25.0
3	徐正刚	山东农业大学动物科技学院	2	10	2.0	2.0
4	张哲	山东农业大学动物科技学院	9	63	4.0	7.0
5	杨云	山东农业大学动物科技学院	5	46	4.0	5.0
6	王守栋	山东农业大学动物科技学院	3	38	3.0	3.0
7	杨伦	山东农业大学动物科技学院	5	37	5.0	5.0
8	房国锋	山东农业大学动物科技学院	3	18	2.0	3.0