Et-DHA通过激活线粒体途径和T细胞granzyme B诱导HepG2细胞凋亡

• 作者: 刘轲莉 王雪君 陈凤佳 陈永顺 陈韵帆 陈鲲 鲁建军
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 二十二碳六烯酸 HepG2细胞 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9 颗粒酶B 细胞色素C Smac 蛋白
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 385-393
• 页数: 9页
• 分类号: R363
• 字数: 6984字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2014.03.001

摘要

目的:本研究探讨了二十二碳六烯酸乙酯(Et-DHA)对人肝癌HepG2细胞凋亡的影响.方法:HepG2细胞用于检测Et-DHA的抑癌活性,MTT法检测Et-DHA对HepG2细胞的直接抑制作用,Hoechst 33258荧光染色观察细胞的形态特征,ELISA法检测Et-DHA处理后HepG2细胞的活性氧簇(ROS)释放量、总超氧化物歧化酶(SOD)和caspase-9活性,Western blotting法检测胞质和线粒体中Bax、Bak、Bid、Bcl-2、Smac和细胞色素C(Cyt C),以及胞质中cleaved caspase-8、cleaved caspase-9和cleaved caspase-3的水平;T细胞与HepG2细胞共培养,进一步观察Et-DHA处理后T细胞的增殖对HepG2细胞活性的影响,并检测了颗粒酶(granzyme)B的水平.结果:Et-DHA显著抑制HepG2细胞的生长(P＜0.05),这种抑制作用具浓度效应和时程效应;Et-DHA处理后HepG2细胞的ROS释放量增加,但总SOD活性无明显变化,caspase-9活性显著上升(P＜0.05);线粒体上的促凋亡蛋白Bax、Bak和Bid水平增加,而抑凋亡蛋白Bcl-2以及线粒体中Cyt C和Smac的水平降低,胞质中的Cyt C、Smac、cleaved caspase-8、cleaved caspase-9、cleaved caspase-3以及cleaved Bid水平呈剂量性升高.另外 T细胞和HepG2细胞共培养组在Et-DHA的诱导下,HepG2细胞的凋亡程度与Et-DHA单独作用时相比进一步增加.在Et-DHA刺激下,T细胞内granzyme B上调,释放到HepG2 细胞内的granzyme B明显增多.结论:Et-DHA可能主要通过线粒体内源性途径以及caspase-8途径,激活caspase-3,诱导HepG2细胞凋亡,以及通过间接活化T细胞,促使 granzyme B增多,从而增强对HepG2细胞的毒性作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	鲁建军	中山大学附属第一医院胸外科	50	181	8.0	9.0
2	陈凤佳	中山大学附属第一医院胸外科	5	139	2.0	5.0
3	刘轲莉	广州大学基因干扰研究所	2	2	1.0	1.0
4	陈鲲	广州大学基因干扰研究所	5	4	1.0	1.0
5	王雪君	广州大学基因干扰研究所	3	3	1.0	1.0
6	陈永顺	广州大学基因干扰研究所	1	2	1.0	1.0
7	陈韵帆	广州大学基因干扰研究所	1	2	1.0	1.0