一种高保真单向DNA合成方法初步探索

• 作者: 凌焱 刘刚 吴逊 周围 张昕 李北平 李炳娟 李玉霞 白东梅 陈惠鹏
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 生物学
• 关键词: DNA片段合成 单向延伸 高保真DNA单向合成法
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 527-531
• 页数: 5页
• 分类号: Q523
• 字数: 4353字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2014.07.014

摘要

目的：建立一种高保真、简单快速的DNA片段合成方法。方法提出一种高保真DNA单向合成方法（ high fidelity DNA unidirection synthesis method ， HFUS），主要在Phusion DNA聚合酶、BsrDⅠ限制性内切酶和λ外切酶3种酶协同作用下，将一条正向DNA单链和数条反向DNA单链通过逐个顺序扩增的方式，最终合成出目的DNA片段。该方法采用37℃、50℃和72℃3个温度的快速转换实现片段扩增的分步有序化合成。结果通过HFUS法，初步合成出2条长度分别为340 bp、450 bp的DNA随机序列片段。结论该研究探索了一种新的合成DNA片段的方法，初步实现了长达450 bp DNA片段的快速合成，为DNA合成方法提供了新的思路。