牛病毒性腹泻病毒 NS3蛋白的原核表达及鉴定

• 作者: 刘加波 庞耀珊 罗思思 范晴 谢丽基 谢志勤 谢芝勋 邓显文
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 牛病毒性腹泻病毒 NS3 原核表达 鉴定
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 36-39
• 页数: 4页
• 分类号: S852.653
• 字数: 2860字
• 语种: 中文

摘要

旨在制备高纯度的牛病毒性腹泻病毒（BVDV）NS3蛋白，为建立牛病毒性腹泻 ELISA 检测试剂盒奠定基础，用于区分疫苗免疫和野毒感染。根据 GenBank 中已发表的牛病毒性腹泻病毒非结构蛋白NS3基因设计一对特异性引物，用 PCR 扩增1206 bp 目的片段，克隆到 pET-32a 表达载体，成功构建重组质粒 pET-32a-NS3。将重组质粒转化大肠埃希菌 Transetta（DE3）用 IPTG 诱导表达，通过 SDS-PAGE 分析，结果表明重组 NS3蛋白在体外得到较好表达，表达的融合蛋白分子质量为61 ku。可溶性分析表明重组NS3蛋白以包涵体的形式存在，经镍柱 His 标签蛋白纯化后进行 Western blot 鉴定，结果表明表达的 NS3重组蛋白能与 BVDV 的阳性血清反应。说明所制备的 NS3蛋白反应性好，可用作 ELISA 的包被抗原。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘加波		118	1407	21.0	29.0
2	谢芝勋		139	1616	23.0	31.0
3	谢志勤		104	1135	18.0	27.0
4	庞耀珊		118	1412	21.0	30.0
5	邓显文		118	1428	21.0	30.0
6	范晴		14	165	6.0	12.0
7	谢丽基		73	730	16.0	23.0
8	罗思思		2	12	2.0	2.0