家蝇伴侣蛋白TCP-1基因的序列分析、克隆及诱导表达

• 作者: 吴建伟 吴沁怡 国果 赵学军 陶如玉
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 家蝇TCP 序列分析 基因克隆 表达
• 年，卷（期）: 2014,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 151-155
• 语种: 中文

摘要

旨在对EST筛选得到的家蝇伴侣蛋白TCP-1 (MD-TCP Ⅰ)基因进行序列分析,克隆其cDNA序列并在大肠杆菌中诱导表达.采用EST测序技术从已构建的家蝇幼虫cDNA质粒文库中筛选到MD-TCP Ⅰ基因,对其进行序列测定和分析.以该基因的cDNA文库质粒为模板,通过PCR的方法进行扩增,以pET-28a(+)为载体构建重组质粒,再转化到表达宿主大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达.表达产物通过SDS-PAGE进行鉴定.结果显示,MD-TCP Ⅰ基因ORF全长753 bp,编码250个氨基酸,理论分子量27.07 kD;等电点5.92,该序列编码的蛋白属于热休克蛋白60家族的TCP.构建了正确基因序列MD-TCP Ⅰ重组表达质粒,重组蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	国果	贵阳医学院基础医学院	62	450	11.0	16.0
2	吴建伟	贵阳医学院基础医学院	83	698	14.0	21.0
3	吴沁怡	贵阳医学院基础医学院	7	14	2.0	3.0
4	赵学军	贵阳医学院基础医学院	5	8	2.0	2.0
5	陶如玉	贵阳医学院基础医学院	2	3	1.0	1.0