金黄色葡萄球菌SirH主要抗原表位区的表达及其抗血清制备

• 作者: 刘丽娜 周静 张洁 胡祖权 谭承建 贾义 钟乃凤
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 金黄色葡萄球菌 SirH 抗原表位 蛋白表达 抗血清制备
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 24-27
• 页数: 4页
• 分类号: S852.611|Q789
• 字数: 2810字
• 语种: 中文

摘要

为在大肠埃希菌中表达金黄色葡萄球菌Sir H主要抗原表位区并制备相应纯化重组蛋白的抗血清，通过生物信息学软件分析Sir H的主要抗原表位区，PCR扩增Sir H主要抗原表位区的编码序列，插入表达载体pGEX-4T-1中，构建重组表达载体pGEX4T1-sirH。该载体经酶切和DNA测序鉴定正确后，转化大肠埃希菌BL21，IPTG诱导表达，GST 亲和层析纯化获得重组蛋白后，采用Western blot方法检测目的蛋白的反应原性。用纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体，间接ELISA检测抗血清效价。结果显示，PCR扩增的SirH主要抗原表位区的编码序列长度约759 bp ，SDS-PAGE初步测定表达蛋白的分子质量约为54 ku ，与理论值相符。亲和层析纯化获得了目的蛋白，Western blot结果证实该纯化蛋白能与乳房炎患病奶牛恢复期的血清发生反应。应用纯化蛋白免疫新西兰大白兔后制备的抗血清效价在1∶409600以上。结果表明，Sir H主要抗原表位区能刺激机体产生较强的体液免疫应答，Sir H是一个有潜力的疫苗候选抗原。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘丽娜	贵阳医学院生物技术教研室	48	344	8.0	16.0
2	张洁	贵阳医学院生物技术教研室	17	49	4.0	5.0
3	周静	贵阳医学院生物技术教研室	6	7	2.0	2.0
4	胡祖权	贵阳医学院生物技术教研室	3	7	1.0	2.0
5	贾义	贵阳医学院生物技术教研室	3	1	1.0	1.0
6	钟乃凤	贵阳医学院生物技术教研室	2	12	1.0	2.0
7	谭承建	贵州民族大学化学与环境科学学院	15	34	4.0	5.0