壳聚糖酶基因在软骨细胞中的表达及对壳聚糖介导基因转染的影响

• 作者: 卢华定 连礼熠 陈明伟
• 来源期刊: 中国矫形外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 壳聚糖酶 壳聚糖 非病毒基因载体 基因转染 软骨细胞
• 年，卷（期）: 2014,（22）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2089-2094
• 分类号: R687
• 语种: 中文
• DOI: 10.3977/j.issn.1005-8478.2014.22.15

摘要

[目的]探讨携带壳聚糖酶(CSN)基因的重组慢病毒感染软骨细胞后影响CSN活性的因素,及CSN在壳聚糖(CS) /DNA纳米粒介导基因转染软骨细胞中的作用.[方法]构建携带CSN和红色荧光带白(RFP)基因的重组慢病毒(LV-CSN)并感染兔关节软骨细胞,流式细胞仪及荧光显微镜检测其感染率;二硝基水杨酸比色法(DNS)检测对CSN活性的影响因素;以CS/DNA纳米粒介导体外基因转染软骨细胞,检测CSN对CS/DNA纳米粒介导基因转染软骨细胞的作用.[结果]带RFP基因的LV-CSN感染软骨细胞后48 h和第7d,RFP表达率分别为(91.40±0.98)％和(91.67 ±1.00)％,二者差异无统计学意义(P=0.583).pH值、温度及铜离子浓度对CSN的活性有明显影响.LV-CSN感染软骨细胞后CS/DNA组的基因转染效率显著高于裸pDNA组和CS/DNA组(P＜0.05),但铜离子可以拮抗这种作用.[结论]在一定时间内LV-CSN感染软骨细胞后可稳定表达CSN,CSN的活性受pH值、温度及铜离子浓度的影响;CSN可提高CS/DNA对软骨细胞的基因转染效率,铜离子则可拮抗这种作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢华定	中山大学附属第三医院骨科	55	691	16.0	23.0
2	陈明伟	中山大学附属第三医院骨科	4	6	2.0	2.0
3	连礼熠	中山大学附属第三医院骨科	3	7	2.0	2.0