人单核细胞株THP-1中HMGN2的分离纯化及其抗乙型肝炎病毒活性

• 作者: 张敏 张远 童荣生
• 来源期刊: 中国医院药学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人THP-1细胞 HMGN2 分离纯化 抗HBV
• 年，卷（期）: 2014,（17）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1445-1449
• 分类号: R969
• 语种: 中文
• DOI: 10.13286/j.cnki.chinhosppharmacyj.2014.17.05

摘要

目的:从人单核细胞株THP-1中分离与纯化HMGN2抗菌肽,应用HepG 2.2.15细胞株作为体外抗乙型肝炎病毒的实验模型,以探讨HMGN2分子的抗HBV作用.方法:采用HPLC分离纯化,Tricine-SDS-PAGE电泳、质谱精确分子量测定、Western blotting对分离纯化得到的HMGN2分子进行分子鉴定.以HBV DNA转染的细胞株HepG 2.2.15细胞为模型,用不同浓度HMGN2分子作用于HepG 2.2.15细胞,分别在第4天和第8天收集细胞培养上清液,ELISA检测上清中HBV表面抗原(HBsAg)及e抗原(HBeAg),采用实时荧光定量PCR法检测上清液HBV DNA的含量.结果:从人单核细胞株THP-1中分离纯化获得纯度较高的HMGN2蛋白;其在1～100 mg· L-1范围内,对HepG 2.2.15细胞无细胞毒性;HMGN2蛋白分子在1～5 mg·L-1水平即可显著抑制HBeAg和HBsAg的表达,可显著降低HBV DNA拷贝数,继续增加剂量抗病毒效果不再明显增加.结论:HMGN2在体外细胞培养中具有直接抗HBV活性.