鸡白痢沙门菌C79-13ΔcrpΔasd平衡致死系统的构建及其生物学特性的研究

• 作者: 尚珂 张春杰 李银聚 李静 程相朝 赵战勤 郁川 陈松彪
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡白痢沙门菌C79-13 asd+平衡致死系统 重组自杀性质粒 活疫苗载体
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 1083-1087,1092
• 页数: 6页
• 分类号: S852.612
• 字数: 4898字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2014.08.017

摘要

目的：为了研制更加安全的鸡白痢沙门菌弱毒株，并将其开发为疫苗活载体。方法：本研究构建了鸡白痢沙门菌C79-13ΔcrpΔasd缺失株。双基因缺失株的构建是以含有重组自杀性质粒pREΔasd的大肠杆菌χ7213为供体菌，C79-13Δcrp为受体菌进行接合转移，两步法筛选crp/asd基因双缺失突变株。结果：PCR及测序结果表明C79-13ΔcrpΔasd构建成功。进一步研究表明，该缺失株的生长需要外源的二氨基庚二酸（DAP），且能稳定遗传缺失的asd基因，与亲本株C79-13相比，其血清型未发生变化，但其生长速度明显减慢，毒力明显降低。结论：C79-13ΔcrpΔasd双缺失株可接受asd＋质粒作为宿主平衡致死系统高效稳定地表达外源基因，并为研制安全有效的鸡白痢沙门菌疫苗弱毒株以及进一步将其开发为适于黏膜免疫的口服活载体疫苗奠定了基础。