小檗碱与育亨宾对脓毒症小鼠脾细胞凋亡的影响及其机制研究

• 作者: 余小慧 吕秀秀 李红梅 杨多猛 王华东 王媛 贾宝银 陆大祥
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 小檗碱 育亨宾 细胞凋亡 脓毒症 脾淋巴细胞
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2206-2212
• 页数: 7页
• 分类号: R285.5|R163+.2
• 字数: 5492字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2014.12.016

摘要

目的：探讨小檗碱与育亨宾对脓毒症小鼠脾细胞凋亡的影响及其作用机制。方法：采用盲肠结扎穿孔（ CLP）构建小鼠脓毒症模型，分为假手术（ sham）组、CLP组、CLP＋小檗碱组、CLP＋育亨宾组、CLP＋小檗碱与育亨宾合剂组。 CLP术后2 h灌胃给予相应药物，20 h后取脾脏，用TUNEL和流式细胞术检测小鼠脾细胞凋亡，酶荧光法检测caspase-3、caspase-8和caspase-9的活性变化，Western blotting检测凋亡相关蛋白Fas、Bim、Bcl-2和Bax的表达。结果：（1） CLP组脾脏TUNEL阳性细胞百分率显著高于sham组（P＜0.05），CLP＋育亨宾与小檗碱合剂组、CLP＋育亨宾组凋亡细胞百分率显著低于CLP组（P＜0．05）。（2）流式细胞仪检测显示CLP组凋亡的脾细胞及T淋巴细胞明显多于sham组（P＜0.05），CLP＋育亨宾与小檗碱合剂组、CLP＋育亨宾组凋亡的脾细胞及T淋巴细胞明显少于CLP组（P＜0.05）。（3） CLP＋育亨宾与小檗碱合剂组、CLP＋育亨宾组脾细胞caspase-3、caspase-8、caspase-9的活性均低于CLP组（P＜0.05）；而CLP＋小檗碱组脾细胞caspase-9活性也低于CLP组（P＜0.05）。（4） CLP＋育亨宾与小檗碱合剂组胞浆Fas、Bim、Bax表达均低于CLP组，CLP＋育亨宾组胞浆Fas表达低于CLP组，CLP＋小檗碱治疗组胞浆Bim、线粒体Bax表达均低于CLP组。结论：（1）小檗碱与育亨宾合用可通过阻断内、外源性凋亡途径抑制脓毒症小鼠脾细胞凋亡，特别是T淋巴细胞凋亡。（2）育亨宾主要通过抑制Fas的表达、进而阻断内、外源性凋亡途径减少脓毒症诱导的脾细胞凋亡。（3）小檗碱可抑制脓毒症小鼠脾细胞线粒体凋亡途径，但对脓毒症小鼠脾细胞凋亡的抑制作用并不明显。