IFN-λR1与TRAF6的相互作用及对NF-κB与ISRE活性的影响

• 作者: 张俊文 杨霞 陈虹 黄秉仁
• 来源期刊: 医学研究杂志
• 学科: 医学
• 关键词: IFN-λR1 TRAF6 NF-κB ISRE 相互作用
• 年，卷（期）: 2014,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 53-58
• 页数: 6页
• 分类号: R3
• 字数: 4744字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建含有信号肽的全长IFN-λR1质粒,研究在配体IFN-λ1存在的情况下IFN-λR1与TRAF6的相互作用及对NF-κB与ISRE活性的影响.方法 利用多次PCR将信号肽编码序列引入IFN-λR1序列中,构建表达载体,用免疫荧光及膜蛋白分离实验鉴定IFN-λR1的表达定位.用免疫共沉淀的方法研究IFN-λ1刺激下IFN-λR1与TRAF6间的相互作用.用双荧光素酶报告基因实验研究IFN-λR1与TRAF6相互作用后对下游NF-κB与ISRE活性的影响,采用实时定量PCR的方法检测此种作用对OAS1与Mx1基因表达的影响.结果 成功构建了含信号肽的全长IFN-λR1表达载体,细胞内表达的IFN-λR1可正确定位于细胞膜上.细胞共转染IFN-λR1和TRAF6,在免疫沉淀物中可以检测到两个蛋白同时存在.细胞内共表达的IFN-λR1能够抑制TRAF6诱导的NF-λB的激活,而共表达的TRAF6可以抑制IFN-λR1下游ISRE的活性,并下调OAS1与Mx1基因的表达.结论 证实了在IFN-λ1存在下IFN-λR1与TRAF6的相互作用及二者相互作用对各自细胞信号转导通路的影响,为TRAF6作为IFN-λ受体信号通路中的相互作用蛋白提供了新的实验依据.