全骨髓贴壁接触培养SD大鼠骨髓间充质干细胞

• 作者: 夏海军 宫宇 王鸿飞
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 骨髓干细胞 骨髓间充质干细胞 SD大鼠 分离 培养 贴壁法 诱导分化
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 研究与报告 -- 骨髓干细胞
• 页码范围: 51-56
• 页数: 6页
• 分类号: R394.2
• 字数: 5767字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.01.009

摘要

背景：体外分离培养出生长状态好、高纯度、增殖能力强和数量充足的大鼠骨髓间充质干细胞，是将其作为种子细胞用于组织和细胞移植的重要前提。<br>　　目的：建立简便、快速、有效的SD大鼠骨髓间充质干细胞体外分离培养方法，并观察其生物学特性。<br>　　方法：采用全骨髓法将 SD 大鼠双侧股骨和胫骨骨髓细胞进行体外分离培养，贴壁接种法进行细胞纯化、传代。观察细胞生长形态及特征，绘制细胞生长曲线，检测细胞表面标记物，采用体外诱导剂诱导细胞分别向成骨、成软骨、成脂方向分化。<br>　　结果与结论：全骨髓贴壁接种法分离培养的骨髓间充质干细胞生长旺盛、纯度高，细胞生长形态呈长梭形，极性排列，细胞生长呈S形生长曲线，群体倍增时间为29 h，细胞在连续传10代后仍具有较强的增殖能力。第3代骨髓间充质干细胞的表面标记物CD44、CD29、CD90均呈阳性表达，CD45、CD34、CD11b则呈阴性表达。第3代骨髓间充质干细胞分别经成骨、成软骨、成脂诱导剂诱导后，茜素红染色、碱性磷酸酶染色、von-kossa矿化结节染色、甲苯胺蓝染色和油红O染色均呈阳性。结果验证全骨髓贴壁接种法是一种简便可靠的体外分离培养方法，能获得纯度较高的骨髓间充质干细胞，经实验鉴定第3代骨髓间充质干细胞生物活性最佳，且具有多向诱导分化能力，适合作为后续实验的种子细胞。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王鸿飞	大连医科大学附属第二医院骨外科	21	228	9.0	14.0
2	宫宇	大连医科大学附属第二医院骨外科	1	19	1.0	1.0
3	夏海军	大连医科大学附属第二医院骨外科	1	19	1.0	1.0