玉米和拟南芥的原生质体制备及瞬时表达体系的研究

• 作者: 卢运明 张占路 王磊 赵杨敏 赵苏州
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 玉米 原生质体 拟南芥
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 3479-3482
• 页数: 4页
• 分类号: S513|Q819
• 字数: 4845字
• 语种: 中文

摘要

[目的]优化玉米和拟南芥原生质体的制备条件及瞬时表达体系.[方法]以不同时期玉米叶片和拟南芥为材料分离原生质体,通过对不同酶浓度,解离时间和渗透压的研究,优化最佳分离原生质体体系;原生质体再经PEG介导的转化,通过GFP基因表达百分比鉴定原生质体活性和转化效率.[结果]玉米和拟南芥原生质分离的最佳条件为:纤维素酶1.5％,离析酶0.5％;拟南芥酶解4h,甘露醇浓度0.4 mol/L;玉米酶解6h,甘露醇浓度0.45 ～0.50 mol/L.最佳生长时期为:拟南芥6～8片叶;玉米二片叶.用去内毒素质粒经PEG(玉米30％ PEG,拟南芥40％ PEG)诱导转化置于黑暗下培养,原生质体活性和转化效率较高,原生质体中可以观察到明显的GFP荧光.[结论]玉米和拟南芥原生质体的制备受酶浓度,解离时间和渗透压的影响,在原生质体转化过程中,质粒DNA纯度,PEG浓度等是影响转化效率的关键因素,与拟南芥原生质体相比玉米原生质体要稳定性差一些.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王磊	西南科技大学生命科学与工程学院	169	1864	23.0	36.0
5	赵苏州	西南科技大学生命科学与工程学院	1	8	1.0	1.0