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Ca2+荧光蛋白探针Cameleon和荧光染料探针fluo-3测定H2O2刺激的A549细胞中Ca2+浓度变化
Ca2+荧光蛋白探针Cameleon和荧光染料探针fluo-3测定H2O2刺激的A549细胞中Ca2+浓度变化
作者:
于淼
周末
崔泽实
张四洋
邱雪杉
高建
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
Cameleon YC3.6
fluo-3
H2O2
Ca2+
细胞凋亡
摘要:
目的:本研究旨在观察Ca2+荧光蛋白探针Cameleon和荧光染料探针fluo-3在H2O2刺激的A549细胞中的应用,实时测定细胞质Ca2+浓度([Ca2+]i),并比较两种Ca2+探针在荧光曲线及[Ca2+]i测定值等方面的差异.方法:采用Ca2+荧光蛋白探针Cameleon YC3.6转染A549细胞,24h后用50mmol/L H2O2刺激细胞,激光扫描共聚焦显微镜实时测定选取细胞的[Ca2+]i变化.采用Ca2+荧光染料探针fluo-3负载细胞,1h后用50mmol/L H2O2刺激细胞,激光扫描共聚焦显微镜实时测定选取细胞的[Ca2+]i变化.采用DAPI染色试剂盒观察H2O2刺激后细胞凋亡情况.结果:采用Cameleon探针转染的细胞中,反映[Ca2+]i变化的R值曲线迅速升高后逐渐降至刺激前水平,通过公式计算发现[Ca2+]i变化范围是33.1-596.1 nmol/L.采用fluo-3探针负载的细胞中,反映[Ca2+]i变化的荧光强度F值曲线逐渐升高至稳定,通过公式计算得到[Ca2+]i变化范围是131.8-695.6 nmol/L.同时发现经H2O2刺激后,凋亡细胞百分比显著增加(P<0.01).结论:Ca2+荧光蛋白探针Cameleon YC3.6和荧光染料探针fluo-3均检测到H2O2诱导的细胞内[Ca2+]i变化,Cameleon YC3.6可能更灵敏地反映快速变化的钙信号.
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文献信息
篇名
Ca2+荧光蛋白探针Cameleon和荧光染料探针fluo-3测定H2O2刺激的A549细胞中Ca2+浓度变化
来源期刊
现代肿瘤医学
学科
医学
关键词
Cameleon YC3.6
fluo-3
H2O2
Ca2+
细胞凋亡
年,卷(期)
2014,(7)
所属期刊栏目
基础研究
研究方向
页码范围
1497-1501
页数
5页
分类号
R730|R734.2
字数
4474字
语种
中文
DOI
10.3969/j.issn.1672-4992.2014.07.05
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
高建
中国医科大学实验技术中心
21
90
6.0
8.0
2
邱雪杉
中国医科大学病理学教研室
75
443
11.0
15.0
3
于淼
中国医科大学实验技术中心
74
341
8.0
16.0
4
张四洋
中国医科大学实验技术中心
15
54
4.0
7.0
5
崔泽实
中国医科大学实验技术中心
94
470
11.0
15.0
6
周末
中国医科大学实验技术中心
12
23
4.0
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研究主题发展历程
节点文献
Cameleon YC3.6
fluo-3
H2O2
Ca2+
细胞凋亡
研究起点
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研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
现代肿瘤医学
主办单位:
中国抗癌协会
陕西省抗癌协会
陕西省肿瘤防治研究所
陕西省医学会
出版周期:
半月刊
ISSN:
1672-4992
CN:
61-1415/R
开本:
大16开
出版地:
西安市雁塔西路309号
邮发代号:
52-297
创刊时间:
1993
语种:
chi
出版文献量(篇)
16990
总下载数(次)
35
总被引数(次)
74603
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