Ca2+荧光蛋白探针Cameleon和荧光染料探针fluo-3测定H2O2刺激的A549细胞中Ca2+浓度变化

• 作者: 于淼 周末 崔泽实 张四洋 邱雪杉 高建
• 来源期刊: 现代肿瘤医学
• 学科: 医学
• 关键词: Cameleon YC3.6 fluo-3 H2O2 Ca2+ 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1497-1501
• 页数: 5页
• 分类号: R730|R734.2
• 字数: 4474字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-4992.2014.07.05

摘要

目的:本研究旨在观察Ca2+荧光蛋白探针Cameleon和荧光染料探针fluo-3在H2O2刺激的A549细胞中的应用,实时测定细胞质Ca2+浓度([Ca2+]i),并比较两种Ca2+探针在荧光曲线及[Ca2+]i测定值等方面的差异.方法:采用Ca2+荧光蛋白探针Cameleon YC3.6转染A549细胞,24h后用50mmol/L H2O2刺激细胞,激光扫描共聚焦显微镜实时测定选取细胞的[Ca2+]i变化.采用Ca2+荧光染料探针fluo-3负载细胞,1h后用50mmol/L H2O2刺激细胞,激光扫描共聚焦显微镜实时测定选取细胞的[Ca2+]i变化.采用DAPI染色试剂盒观察H2O2刺激后细胞凋亡情况.结果:采用Cameleon探针转染的细胞中,反映[Ca2+]i变化的R值曲线迅速升高后逐渐降至刺激前水平,通过公式计算发现[Ca2+]i变化范围是33.1-596.1 nmol/L.采用fluo-3探针负载的细胞中,反映[Ca2+]i变化的荧光强度F值曲线逐渐升高至稳定,通过公式计算得到[Ca2+]i变化范围是131.8-695.6 nmol/L.同时发现经H2O2刺激后,凋亡细胞百分比显著增加(P＜0.01).结论:Ca2+荧光蛋白探针Cameleon YC3.6和荧光染料探针fluo-3均检测到H2O2诱导的细胞内[Ca2+]i变化,Cameleon YC3.6可能更灵敏地反映快速变化的钙信号.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高建	中国医科大学实验技术中心	21	90	6.0	8.0
2	邱雪杉	中国医科大学病理学教研室	75	443	11.0	15.0
3	于淼	中国医科大学实验技术中心	74	341	8.0	16.0
4	张四洋	中国医科大学实验技术中心	15	54	4.0	7.0
5	崔泽实	中国医科大学实验技术中心	94	470	11.0	15.0
6	周末	中国医科大学实验技术中心	12	23	4.0	4.0