shRNA介导的Iduna沉默对肺癌A549细胞系细胞周期及其相关蛋白表达的影响

• 作者: 徐慧慧 惠林萍 李锐 王恩华 王睿 邱雪杉 高英
• 来源期刊: 山西医药杂志
• 关键词: 癌 ,非小细胞肺 泛素蛋白连接酶类 细胞周期 细胞周期蛋白类
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 851-854
• 页数: 4页
• 字数: 2846字
• 语种: 中文

摘要

目的：利用shRNA沉默E3泛素连接酶Iduna基因，观察Iduna对非小细胞肺癌细胞系A549细胞周期及其相关蛋白表达的影响。方法采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白印迹法筛选Iduna高表达细胞系。构建shRNA-Iduna真核表达载体，瞬时转染A549细胞，蛋白印迹法检测转染效率。流式细胞仪检测细胞周期变化。蛋白印迹法检测细胞周期相关蛋白的表达。结果蛋白印迹法筛选Iduna高表达细胞系显示A549和SPC细胞中Iduna mRNA和蛋白水平高于其他细胞系。shRNA-Iduna转染A549细胞系后，流式细胞仪检测细胞周期显示干扰组G0/G1期比例增加，S期比例相对减少（ P ＜0.05）。蛋白印迹法检测与细胞周期相关的G1/S期调控蛋白[细胞周期蛋白（cyclin）A、cyclin D1、cyclin E、CDK2、CDK4、CDK6、P21、P27、P53等]的表达情况，结果显示干扰组cyclin D1、cyclin E和CDK4蛋白表达减少（ P ＜0.05）。结论 Iduna可能通过调控cyclin D1、cyclin E和CDK4蛋白的表达，使细胞阻滞于G0/G1期，从而调节肺癌细胞周期进程。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邱雪杉	中国医科大学附属第一医院病理科	75	443	11.0	15.0
2	王恩华	中国医科大学附属第一医院病理科	135	892	13.0	23.0
3	王睿	中国医科大学附属第四医院病理科	29	106	6.0	9.0
4	惠林萍	中国医科大学附属第四医院中心实验室	16	69	5.0	8.0
5	高英	中国医科大学附属第四医院病理科	40	118	7.0	9.0
6	李锐	中国医科大学附属第四医院病理科	7	23	3.0	4.0
7	徐慧慧	中国医科大学附属第四医院病理科	9	14	3.0	3.0