一种 EGFR基因突变检测方法的建立及初步应用

• 作者: 王倩 罗凯
• 来源期刊: 重庆医学
• 关键词: 受体,表皮生长因子 突变 基因测序 实时荧光定量聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2014,（11）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 1351-1353,1356
• 页数: 4页
• 字数: 4026字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2014.11.024

摘要

目的：建立一种表皮生长因子受体（EGFR）基因实时荧光定量 PCR-Sanger测序突变检测方法，并初步探讨其临床应用价值。方法以EGFR基因热点突变区域19、21外显子为研究位点设计特异性扩增、测序引物，利用已知野生型、突变型样品，以T A克隆技术构建相应质粒作为标准品，建立EGFR基因实时荧光定量PCR-Sanger测序突变检测方法，并进行方法学和应用评估。结果成功构建了EGFR基因19、21外显子野生型、突变型质粒。建立了EGFR基因实时荧光定量PCR-Sanger测序突变检测方法，该方法灵敏度高（101 copy/μL ），重复性好（19、21外显子实时荧光定量 PCR部分批内、批间变异系数分别为1．42％、3．52％和0．97％、2．44％）。该法与传统Sanger测序法同时检测20份临床样品，结果完全相符。结论成功建立了可用于临床样品检测的EGFR基因实时荧光定量PCR-Sanger测序突变检测方法。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王倩	广州市中医医院病理科	11	41	4.0	5.0
2	罗凯		12	22	3.0	4.0