鸡胚致死孤儿病毒和鸡减蛋综合症病毒多重PCR 检测方法的建立及初步应用

• 作者: 付瑞 卫礼 岳秉飞 巩薇 李晓波 王吉 王淑菁 贺争鸣
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡胚致死孤儿病毒 鸡减蛋综合症病毒 禽腺病毒 多重PCR
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 66-70
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65|R332
• 字数: 2753字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671.7856.2015.001.012

摘要

目的：建立鸡胚致死孤儿病毒（ CELO）和鸡减蛋综合症病毒（ EDS）的多重PCR检测方法并进行初步应用。方法参照GenBank提供的基因序列，设计了2对特异性引物分别扩增CELO长纤突蛋白和EDS六邻体蛋白的基因序列，建立检测CELO和EDS的多重PCR方法，考察该方法的特异性和敏感性，并使用该方法检测流感疫苗主种子批病毒是否存在外源性禽腺病毒的污染。结果该多重PCR方法成功扩增得到了两条特异性目的条带，并经测序验证。该方法特异性好，灵敏度显示核酸最低检测量可达10－4μg／mL。使用该方法检测12批次流感疫苗主种子批病毒，外源性禽腺病毒的检测结果均为阴性。结论成功建立鸡胚致死孤儿病毒和鸡减蛋综合症病毒的多重PCR检测方法，灵敏度高，特异性好。在流感疫苗主种子批病毒的外源性禽腺病毒的检测中具有很高的使用价值和应用前景。