白血病细胞中翻译控制肿瘤蛋白的检测及其方法学比较

• 作者: 刘泺 夏迪 张颖婷 童建华
• 来源期刊: 诊断学理论与实践
• 学科: 医学
• 关键词: 翻译控制肿瘤蛋白 流式细胞术 蛋白印迹 白血病细胞株
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 329-333
• 页数: 5页
• 分类号: R733.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.16150/j.1671-2870.2015.04.008

摘要

目的:比较蛋白印迹法和流式细胞术(flow cytometry,FCM)在检测细胞内翻译控制肿瘤蛋白(translationally controlled tumor protein,TCTP)中的优势,并分析两者在临床检测中的应用价值.方法:用1μmol/L全反式维A酸(all-trans-retinoic acid,ATRA)处理NB4和NB4-R1细胞0～96 h,分别采用蛋白印迹法和FCM检测细胞内TCTP蛋白的变化情况,用Bland-Altman分析法分析检测结果的一致性.用FCM检测部分急性白血病患者骨髓原代标本中TCTP蛋白水平.结果:蛋白印迹法检测结果显示,经ATRA处理后NB4细胞内TCTP下降,各时间点(0、24、48、72、96 h)TCTP与β-actin灰度比的相对值分别为1.00、0.97±0.05、0.91±0.03、0.85±0.05和0.72±0.02,而NB4-R1细胞中则保持不变.FCM检测结果显示,经ATRA处理后NB4细胞内各时间点TCTP的阳性率分别为(98.93±0.49)％、(98.83±0.65)％、(96.77±1.45)％、(90.93±1.35)％和(72.17±5.57)％,NB4-R1细胞中保持不变.根据Bland-Altman法,计算可得2种方法测量值95％的一致性区间界限为(-0.081,0.111),本研究所测得的30组数据中有29组落在区间内.对11例急性白血病患者和9例非白血病患者骨髓细胞内TCTP水平的检测结果显示.非白血病患者骨髓细胞内TCTP的表达较低,而白血病患者则相对较高,两者间差异有统计学意义(P＜0.01).结论:蛋白印迹法与FCM检测细胞内TCTP蛋白水平的结果间有良好的一致性,而FCM更加适用于患者的原代标本检测.细胞内TCTP水平的高低可能与白血病的发生、发展有关,今后有可能作为临床白血病检测的分子标志物.