沉默TCF7L2对胰岛素抵抗HepG2细胞胰岛素降解酶表达的调控作用观察

• 作者: 任伟 刘婵 夏佳佳 胡钰梅 郑晓雅
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 糖尿病,2型 胰岛素抗药性 转录因子7样蛋白2 胰岛素溶酶
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 110-116
• 分类号: R587.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.11855/j.issn.0577-7402.2015.02.05

摘要

目的 探讨沉默转录因子7类似物2(TCF7L2)对胰岛素抵抗(IR)HepG2细胞胰岛素降解酶(IDE)表达的调控作用及可能机制.方法 将HepG2细胞分为空白组、TCF7L2干扰组、空载体组、IR组、IR+TCF7L2干扰组、IR+空载体组.采用高浓度胰岛素(5×106mol/L)持续作用24h诱导IR模型(IR-HepG2细胞)生成.以人TCF7L2 mRNA编码序列为干扰靶点构建TCF7L2特异性小干扰RNA慢病毒载体(LV-TCF7L2-siRNA)转染空白组及IR组细胞,空载体病毒转染空载体组及IR+空载体组细胞.qRT-PCR法检测各组细胞TCF7L2及IDE mRNA的表达,Western blotting检测各组细胞TCF7L2、IDE、胰岛素刺激后蛋白激酶B(AKT)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白表达的变化,流式细胞术检测各组2-脱氧-D-葡萄糖(2-NBDG)荧光葡萄糖摄取率.结果 与空白组比较,IR组细胞葡萄糖消耗量及2-NBDG摄取率均明显降低(P＜0.01),证明IR细胞模型建立成功.qRT-PCR及Western blotting结果显示,IR组TCF7L2及IDE mRNA种蛋白表达水平均明显低于空白组(P＜0.05),TCF7L2干扰组TCF7L2、IDE mRNA和蛋白表达水平较空白组、空载体组明显下降,IR+TCF7L2干扰组TCF7L2、IDE mRNA和蛋白表达水平较IR组、IR+空载体组均明显下降(P＜0.05).生理剂量胰岛素刺激后,IR组、IR+TCF7L2干扰组p-AKT蛋白水平较空白组明显下降(P＜0.01),各组总AKT水平差异无统计学意义.TCF7L2干扰组2-NBDG荧光葡萄糖摄取率较空白组和空载体组明显下降,IR+TCF7L2干扰组2-NBDG荧光葡萄糖摄取率较IR组、IR+空载体组明显下降(P＜0.01).结论 TCF7L2联合IDE致肝细胞IR,其机制可能与减少胰岛素信号通路关键酶p-AKT蛋白的表达有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑晓雅	重庆重庆医科大学附属第一医院内分泌科	2	5	1.0	2.0
2	任伟	重庆重庆医科大学附属第一医院内分泌科	3	9	2.0	3.0
3	夏佳佳	重庆重庆医科大学附属第一医院内分泌科	1	4	1.0	1.0
4	刘婵	重庆重庆医科大学附属第一医院内分泌科	1	4	1.0	1.0
5	胡钰梅	重庆重庆医科大学附属第一医院内分泌科	1	4	1.0	1.0