吉非替尼可能通过EGFR启动子甲基化诱导肺腺癌细胞继发性耐药

• 作者: 李敏 王起龙 胡成平
• 来源期刊: 中国肺癌杂志
• 关键词: 肺肿瘤 酪氨酸激酶抑制剂 继发性耐药 表皮生长因子受体 甲基化
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 193-198
• 页数: 6页
• 字数: 4972字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3779/j.issn.1009-3419.2015.04.04

摘要

背景与目的 在肺腺癌靶向治疗中的吉非替尼继发性耐药是临床遇到的重要问题.本研究旨在探讨吉非替尼是否可诱导肺腺癌PC9细胞发生继发性耐药,以及表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)启动子甲基化在耐药过程中的作用,拟为肺腺癌耐药提供新的治疗靶点.方法 体外培养肺腺癌吉非替尼敏感细胞株PC9,应用不同浓度吉非替尼进行干预.MTT法检测PC9细胞株对吉非替尼的敏感性.亚硫酸氢盐处理后测序法(bisulfite sequencing polymerase chain reaction, BSP)检测肺腺癌PC9细胞株EGFR启动子甲基化水平.使用5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-dc)对吉非替尼耐药细胞株PC9/GR细胞株进行干预.MTT法检测耐药株PC9/GR对吉非替尼敏感性的变化.结果 经过从0.01 μmol/L逐渐提升吉非替尼诱导浓度至3 μmol/L之后,MTT显示耐药细胞株PC9/GR细胞株半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration, IC50)[(3.95±0.23)μmol/L]较之前敏感株PC9[(0.01±0.002) μmol/L]明显升高(P<0.05),BSP显示发生异常甲基化的位点结果比较：PC9/GR甲基化水平明显升高(74% vs59%, P<0.05).RT-PCR显示PC9/GR细胞株较PC9细胞株EGFR mRNA表达量升高(P<0.05).使用5-Aza-dc处理PC9/GR细胞后,PC9/GR细胞株IC50较对照组降低[(2.55±0.14)μmol/L vs (3.87±0.034)μmol/L, P<0.05)].结论 吉非替尼体外浓度递增诱导法可诱导PC9细胞株产生吉非替尼继发性耐药,成功构建PC9/GR耐药细胞株.PC9细胞EGFR启动子甲基化异常可能参与了吉非替尼继发性耐药机制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡成平	中南大学湘雅医院呼吸内科	314	2001	22.0	29.0
2	李敏	中南大学湘雅医院呼吸内科	116	690	14.0	20.0
3	王起龙	中南大学湘雅医院呼吸内科	3	2	1.0	1.0