猪传染性胃肠炎病毒HN-2012分离株S基因的遗传变异分析及其真核表达

• 作者: 刘中原 寇亚楠 崔保安 张莉娟 徐卫松 程慧芳 胡慧 陈雅君
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪传染性胃肠炎病毒 S蛋白基因 293T细胞 真核表达
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 32-36
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.6
• 语种: 中文

摘要

以猪传染性胃肠炎病毒(TGEV) HN-2012株的cDNA为模板,经克隆测序后,将得到的S基因序列及其推导的氨基酸序列与NCBI中不同来源的TGEV毒株的相应序列进行同源性和亲缘关系的比较分析,构建系统进化树进行遗传变异分析;然后将S基因亚克隆至真核表达载体pCAGGS-S-flag中,转染293T细胞进行表达,利用flag标签抗体进行Western-blot分析.结果显示,TGEV HN-2012株的S基因与其他毒株间核苷酸和氨基酸的同源性分别为95.1％～99.1％和93.6％～95.2％,与H株的亲缘关系较近,与我国其他毒株的亲缘关系较远.Western-blot分析中可见大小约为160 ku的目的条带,表明S基因成功在293T细胞中表达.本试验结果为深入研究TGEV S蛋白的生物学功能奠定了基础.