猪白细胞介素21基因的原核表达与多抗血清的制备

• 作者: 刘星 周雪晨 姜平 朱雪蛟 白娟 范宝超
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪 白细胞介素21 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 352-355
• 页数: 4页
• 分类号: S852.42
• 语种: 中文

摘要

为了制备猪白细胞介素21(porcine interleukin-21,pIL-21)的多克隆抗体,采用RT-PCR从猪外周血单个核细胞(PBMC)扩增获得pIL-21基因,然后将其克隆至大肠杆菌表达载体pET-32a(+)之中,转化至大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达.SDS-PAGE和Western-blot分析结果显示,pIL-21以可溶性蛋白形式表达,分子质量为35 ku,具有良好的反应原性.经过Ni-NTA镍离子亲和层析纯化,获得纯化的重组蛋白pIL-21.用其免疫BALB/c小鼠制备抗pIL-21血清抗体.Western-blot分析结果显示,该抗体可与杆状病毒表达的重组Cap-pIL-21、ConA和PHA共刺激的猪PBMC细胞发生特异性反应,ELISA抗体效价可达1:12 800.上述研究结果为pIL-21的生物学功能研究奠定了重要基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姜平		186	1921	25.0	35.0
2	白娟		37	73	5.0	7.0
3	刘星		3	0	0.0	0.0
4	朱雪蛟		6	6	2.0	2.0
5	范宝超		3	5	1.0	2.0
6	周雪晨		2	4	1.0	2.0