细粒棘球蚴线粒体CO1基因的克隆与序列分析

• 作者: 于晶峰 刘晓松 常建华 木兰 李滨 李秀霞 杨晓野 杨莲茹 王瑞
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 细粒棘球蚴 CO1基因 克隆 序列分析
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 532-536
• 页数: 5页
• 分类号: R383.3
• 字数: 3833字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2015.06.008

摘要

目的 研究细粒棘球蚴(Echinococcus granulasus)种间遗传标记特点,为该虫种的分子分类学研究提供基础.方法 在内蒙古地区从羊肝脏采集细粒棘球蚴,肝包虫病患者手术剥离囊包后,签署知情同意书,采集细粒棘球蚴.提取虫体DNA,扩增线粒体细胞色素氧化酶1(CO1)基因,将其克隆到PGM-T载体后,用PCR技术鉴定阳性菌落,并进行测序,运用DNAstar5.0软件计算序列间的相似性,计算遗传距离,同时,应用MEGA4.0软件的最大似然法(ML-Maximum Likelihood)和邻接法(NJ-Neighbor Joining)构建系统发育树,进行聚类分析.结果 细粒棘球蚴DNA扩增出的羊株、人株CO1基因序列片段长度为936 bp.同其他亲缘关系较近的属CO1基因序列比对:羊株、人株细粒棘球蚴CO1序列与黄花棘球绦虫的同源性最高,分别为91.9％、91.2％;羊株、人株细粒棘球蚴CO1序列与黄花棘球绦虫位于同一分支,自展值(Boostrap)最高,均为100％.羊株、人株细粒棘球蚴CO1序列所属分支与原头目的Proteocephalus macrocephalus所属分支相隔较远.结论 CO1基因序列稳定保守,无宿主特异性,可作为细粒棘球蚴理想的种间遗传标记.