结核分枝杆菌毒素-抗毒素系统 maz EF6缺失突变株的构建及其表型的初步探讨

• 作者: 曹帅丽 申爱平 袁俐 邢建新
• 来源期刊: 微生物与感染
• 关键词: 结核分枝杆菌 毒素-抗毒素系统 缺失突变株
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 180-185
• 页数: 6页
• 字数: 3651字
• 语种: 中文

摘要

为构建结核分枝杆菌毒素‐抗毒素系统 m azEF6缺失突变株，并对其表型进行初步探讨，首先用聚合酶链反应（PCR）分别从H37Rv标准株和PUC‐19K质粒扩增出 mazEF6基因的同源臂及卡那霉素抗性基因kan ；然后应用融合PCR技术将 mazEF6基因的同源臂与 kan基因进行杂交拼接，获得目的融合片段，将该融合片段克隆于pMD‐19T（simple）载体形成自杀质粒pMD‐19T‐ΔmazEF6‐kan ，并将自杀质粒转化至大肠埃希菌DH5α中；最后利用电穿孔技术将自杀质粒电转至H37Rv标准株中，在卡那霉素抗性改良罗氏培养基上筛选H37Rv ΔmazEF6缺失突变株单个菌落，提取阳性菌株全基因组DNA为模板，PCR扩增克隆片段并测序。将所获得的H37Rv ΔmazEF6缺失突变株进行遗传稳定性检测后，对其表型进行初步研究。结果显示，该缺失株在15代内未发生回复性突变；与野生株相比，缺失株生长速度缓慢且细菌形态短小。本研究证实，融合PCR技术便于快速获得结核分枝杆菌缺失突变株；结核分枝杆菌在缺失毒素‐抗毒素系统 m azEF6基因后生存能力下降，这为进一步研究毒素‐抗毒素系统的作用奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	袁俐	石河子大学医学院	35	83	5.0	7.0
2	邢建新	石河子大学医学院	9	16	3.0	3.0
3	申爱平	石河子大学医学院	4	6	2.0	2.0
4	曹帅丽	石河子大学医学院	4	12	2.0	3.0