转录因子Nanog过表达对人牙髓细胞增殖及多向分化能力的影响

• 作者: 宁艳洋 徐琼 李金铃
• 来源期刊: 中华口腔医学研究杂志（电子版）
• 关键词: 牙髓细胞 Nanog 细胞增殖 多向分化能力 多能相关转录因子
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 357-363
• 页数: 7页
• 字数: 5003字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3877/cma.j.issn.1674-1366.2015.05.002

摘要

目的：探讨过表达多能相关转录因子Nanog对人牙髓细胞增殖及多向分化能力的影响。方法构建过表达Nanog的慢病毒载体质粒pSIN?EF2?Nanog?IRES?GFP?puro，采用psPAX和pMD2.G慢病毒包装系统转入293T细胞进行病毒液的生产和收取，转染生长良好的第3代人牙髓细胞，构建稳定过表达Nanog的人牙髓细胞株，以空载体转染的细胞为对照组，对细胞进行成脂及成牙本质诱导。采用BrdU法检测细胞的增殖情况，检测多能性转录因子Oct4和Sox2的表达，以及细胞成脂、成牙本质分化能力。采用单因素方差分析数据。结果成功构建Nanog过表达的人牙髓细胞株；BrdU法检测结果显示，Nanog过表达组比对照组细胞增殖能力强（F=90.421，P=0.000）。过表达组Oct4、Sox2 mRNA和蛋白表达水平明显高于对照组（FOct4 mRNA=71.649，POct4 mRNA=0.000；FSox2 mRNA=106.278，PSox2 mRNA=0.000；FOct4蛋白=41.632，POct4蛋白=0.002；FSox2蛋白=38.962，PSox2蛋白=0.002）。在矿化诱导条件下，Nanog过表达组DSPP、DMP1和OCN表达量、矿化结节产生量高于对照组（FDSPP=15.261， PDSPP＜0.05；FDMP1=16.235，PDMP1＜0.05；FOCN=17.019，POCN＜0.05）；成脂诱导21 d后，Nanog过表达组LPL和PPARγ2表达量及脂质产生高于对照组（FLPL=15.542，PLPL＜0.05；FPPARγ2=10.437，PPPARγ2＜0.05）。结论过表达Nanog能提高人牙髓细胞增殖能力，促进多能性转录因子Oct4、Sox2的表达，增强细胞多向分化能力。