人CCAAT增强子结合蛋白β抑制骨肉瘤细胞增殖

• 作者: 冀全博 张强 张立 徐亚梦 徐小洁 李玲 梁迎春 王涛 郭靖
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: CCAAT增强子结合蛋白β 真核表达 骨肉瘤
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 64-67
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2500字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2015.01.012

摘要

目的:构建带Myc标签的CCAAT增强子结合蛋白β(C/EBPβ)的真核表达载体,并检测其对骨肉瘤细胞增殖的影响.方法:应用PCR技术从人乳腺文库中扩增C/EBPβ全长编码区基因,并克隆到pXJ-40载体中;将重组质粒转染人胚胎肾293T细胞,采用SDS-PAGE和Western印迹鉴定蛋白表达;另将重组C/EBPβ质粒转染人骨肉瘤细胞系U2OS,生长实验检测其对肿瘤细胞增殖的影响.结果:基因测序和双酶切鉴定表明,Myc-C/EBPβ真核表达质粒构建成功;SDS-PAGE和Western印迹结果显示,Myc-C/EBPβ转染人胚胎肾293T细胞后获得表达;生长实验证明C/EBPβ具有抑制骨肉瘤细胞增殖的功能.结论:构建了Myc-C/EBPβ的真核表达载体,为全面了解C/EBPβ的生物学功能及调控机理奠定了基础.