全氟辛酸特异性单域重链抗体的制备

• 作者: 冯艳 张星 王艳 王颖 程亚庭
• 来源期刊: 环境与职业医学
• 学科: 医学
• 关键词: 全氟辛酸 完全抗原 重链抗体文库 间接竞争酶联免疫吸附试验
• 年，卷（期）: 2015,（8）
• 所属期刊栏目: 方法研究
• 页码范围: 744-748
• 分类号: R114
• 语种: 中文
• DOI: 10.13213/j.cnki.jeom.2015.15262

摘要

[目的]基于抗原抗体特异性结合的原理,制备一种针对全氟辛酸(PFOA)小分子的特异性抗体,以用于PFOA的现场快速检测. [方法]采用碳二亚胺法将PFOA与牛血清白蛋白(BSA)偶联,将此完全抗原作为包被抗原,用重链抗体噬菌体文库进行筛选获得阳性克隆,聚合酶链反应扩增重链抗体片段并与含有人抗体Fc段的质粒连接,采用原核表达系统进行抗体蛋白表达和纯化,间接竞争酶联免疫吸附试验(ELISA)进行验证. [结果]成功合成完全抗原PFOA-BSA,偶联比为8.采用重链抗体库进行4轮筛选,获得7株阳性克隆,经进一步的原核表达系统进行蛋白表达和纯化,得到5种与预期大小相符的、含有人抗体Fc段的抗体蛋白.经间接竞争ELISA方法初步检测验证,获得1个可与PFOA特异结合的单域重链抗体. [结论]最终获得针对PFOA的特异性抗体,有望用于建立快速检测不同介质中PFOA的免疫学检测方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王艳	上海交通大学公共卫生学院	91	927	17.0	27.0
2	王颖	上海交通大学基础医学院	126	1374	16.0	35.0
3	冯艳	上海交通大学公共卫生学院	11	45	4.0	6.0
4	张星	上海交通大学公共卫生学院	3	2	1.0	1.0
5	程亚庭		1	1	1.0	1.0