小熊猫源犬瘟热病毒DNA疫苗构建及其在真核细胞的表达

• 作者: 张晓明 彭仕明 陈武
• 来源期刊: 野生动物学报
• 关键词: 犬瘟热病毒 DNA疫苗 载体构建 真核表达
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 279-283
• 页数: 5页
• 分类号: Q858.9
• 语种: 中文

摘要

根据Gen Bank中发表的犬瘟热病毒(CDV)的基因组序列设计了H和F基因的2对引物,通过RT-PCR扩增出从发病小熊猫分离的CDV的H和F基因,并将其克隆入到18T-simple载体上进行测序.使用Kpn Ⅰ和XhoⅠ限制性内切酶对重组载体进行双酶切并将目的基因克隆到pcDNA 3.1表达载体上,构建完成后转染293T细胞,转染48 h后,再利用RT-PCR和Western-blot检测目的基因的转录和目的蛋白的表达.结果表明,表达载体经转染后,在293T细胞中,目的基因均能得到转录而且正确表达.这为下一步基因疫苗的研究奠定了良好的基础.