拟南芥CDR6基因过表达载体构建及过量表达植株筛选鉴定

• 作者: 倪娇娇 张其安 方凌 曹树青 樊婷婷 江海坤 管灵霞 董万春 阳立波
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 拟南芥 CDR6基因 过量表达载体 转基因植株
• 年，卷（期）: 2015,（13）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 63-64,104
• 页数: 3页
• 分类号: S188
• 字数: 2115字
• 语种: 中文

摘要

[目的]以拟南芥为材料克隆CDR6基因,构建CDR6基因的过量表达载体并筛选鉴定获得过表达植株.[方法]提取拟南芥mR-NA,反转录成cDNA,并以此为模板克隆CDR6基因CDS全长,通过限制性内切酶切割、T4 DNA连接酶连接,将CDR6基因CDS全长连接到带有35S强启动子的pXB094载体上;然后转化至Trans1-T1感受态细胞中,菌落PCR鉴定阳性单克隆并测序确认.将重组质粒转化至根瘤农杆菌GV3101菌株,通过浸花法侵染拟南芥野生型植株,通过抗性筛选和鉴定获得预期的转基因植株.[结果]菌落PCR鉴定和测序结果表明CDR6基因已成功构建至pXB094载体;通过抗性筛选并鉴定获得了过量表达阳性植株.[结论]筛选和鉴定获得的过量表达植株为研究CDR6基因的分子功能奠定了基础.