RNA干扰沉默血管紧张素转化酶调节血管紧张素2-血管紧张素1-7肽-胞外信号调节激酶轴改善人脐静脉内皮细胞功能

• 作者: 佟新竹 周勇 曹政 杨勇 罗涛 谢华强
• 来源期刊: 华南国防医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 小干扰RNA 人脐静脉内皮细胞 血管紧张素1-7肽
• 年，卷（期）: 2015,（7）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 507-511
• 页数: 5页
• 分类号: R394.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-2595.2015.07.006

摘要

目的 观察RNA干扰沉默原代培养人脐静脉内皮细胞的血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ACE)对ACE2-血管紧张素1-7肽(angiotensin 1 7,Ang1-7)-胞外信号调节激酶(extracellular regulated kinase,ERK)轴表达和内皮素-1(endothelin-1,ET-1)/一氧化氮(nitric oxide,NO)表达的影响,探讨RNA干扰改善内皮细胞功能的机制.方法 培养原代人脐静脉内皮细胞,脂质体转染化学合成的ACE-siRNA入内皮细胞,观察其对ACE mR-NA和蛋白表达的影响.内皮细胞分为对照组,AngⅡ刺激组(AngⅡ组)及AngⅡ刺激联合ACE-siRNA转染组(AngⅡ+ siRNA组),半定量逆转录RCR法检测各组ACE mRNA表达变化,Western blot法检测各组ACE、ACE2、ERK蛋白表达的变化;酶联免疫法检测各组ET-1、Ang1-7表达水平;酶反应法检测各组NO表达水平.结果 作用于ACE mRNA序列3261-3279位点的ACE-siRNA能在转染后48 h有效抑制ACE mRNA和蛋白表达.和AngⅡ组对比,AngⅡ+ siRNA组ACE2、Ang1-7、ERK蛋白和ET-1表达明显增加(P＜0.05),NO表达下调(P＜0.05);ACE siRNA转染入内皮细胞后,ACE2、Ang1-7、ERK蛋白表达进一步增加(P＜0.05),由AngⅡ诱导的ET-1释放减少(P＜0.05),内皮细胞NO水平升高(P＜0.05).结论 特异性ACE-siRNA对ACE表达有沉默效应,它能进一步调整ACE2表达,并通过激活Ang1-7-ERK轴改善内皮细胞功能.