血管紧张素Ⅱ2型受体抑制小鼠骨髓源树突状细胞的成熟及活化

• 作者: 唐兵 朱峻 李兴科 李刚 李德 杨大春 杨永健 速晓华 陈劲松
• 来源期刊: 中国动脉硬化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 血管紧张素Ⅱ2型受体 基因转染 树突状细胞 细胞成熟 动脉粥样硬化
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 881-886
• 分类号: R363
• 语种: 中文

摘要

目的 研究血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2R)体外基因转染对小鼠骨髓源树突状细胞(BMDC)成熟活化及部分免疫功能的影响,探讨AT2R参与动脉粥样硬化斑块进展的免疫机制.方法 取C57BL/6J小鼠骨髓,经分离、纯化、分化为BMDC,先转染带有绿色荧光蛋白报告基因的AT2R基因重组腺病毒载体(pAdCMV/AT2R)或空病毒载体(pAd-GFP),再用脂多糖刺激为成熟BMDC,分PBS对照组、脂多糖组、pAd-GFP组、pAdCMV/AT2R组及pAdCMV/AT2R+ PD123319组.采用RT-PCR、免疫荧光和激光共聚焦技术方法检测BMDC中AT2R mRNA及蛋白表达;流式细胞术检测BMDC表面标志CD86和MHCⅡ的表达率;液体闪烁计数检测BMDC刺激同源T淋巴细胞增殖的能力;ELISA法检测培养基中白细胞介素12(IL-12)和γ干扰素(IFNγ)的水平.结果 pAdCMV/AT2R转染BMDC后48 ～ 72 h有AT2R mRNA表达,在激光共聚焦显微镜下胞浆及胞核有绿色荧光表达;同时在胞浆有红色荧光AT2R表达.与PBS对照组比较,pAdCMV/AT2R组和pAdCMV/AT2R+ PD123319组CD86和MHCⅡ的表达、同源T淋巴细胞增殖和细胞因子分泌量都显著升高(P＜0.01),但pAdCMV/AT2R组与脂多糖组比较显著降低(P＜0.01或P＜0.05),而pAdCMV/AT2R+ PD123319组与脂多糖组比较差异无显著性(P＞0.05).结论 体外基因转染BMDC能表达AT2R,AT2R能抑制BMDC成熟诱导的局部免疫炎性反应,且AT2R拮抗剂能阻断此效应,推测AT2R可能介导稳定斑块及抑制动脉粥样斑块进展的作用.