甘蓝型油菜抗苯磺隆突变体ALS基因分析与SNP标记

• 作者: 吕金洋 孙妍妍 曲高平 胡胜武 郭媛 黄谦心
• 来源期刊: 中国油料作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 油菜 抗除草剂突变体 苯磺隆 乙酰乳酸合成酶 等位基因特异PCR 单核苷酸多态性
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 遗传育种
• 页码范围: 589-595
• 页数: 7页
• 分类号: S565.403
• 字数: 5936字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7505/j.issn.1007-9084.2015.05.001

摘要

为筛选新型甘蓝型油菜抗苯磺隆除草剂的等位基因特异分子标记,以EMS诱变的甘蓝型油菜中双9号M2群体(约30 000单株)为材料,通过苯磺隆喷药处理筛选到3株抗除草剂突变体(分别记为K1、K4、K5).利用PCR技术克隆到抗性突变体相应的BnALS1、BnALS2、BnALS3基因,序列分析结果表明,K1和K4的BnALS3基因序列发生碱基突变,其中第+ 535位C碱基突变为T,导致其编码的BnALS3蛋白第197位氨基酸由Pro突变为Ser;而K5的BnALS1基因序列第+544位C突变为T,导致其编码的BnALS1蛋白发生了Pro197Ser的改变(均以拟南芥ALS氨基酸序列为准).其中K5抗性位点BnALS1:Pro197Ser的改变属于首次报道.基于突变的基因序列设计了8对等位基因特异性PCR引物组合,有6对能用于区分抗性突变体和野生型材料,其中可检测K5的BnALS1基因SNP位点的引物有2对,可检测K1、K4突变体BnALS3基因SNP位点的引物有4对.