一种构建载体的新方法:一步式混合胶回收连接法

• 作者: 刘双清 成小文 李顺姬 胡珏 黄国华
• 来源期刊: 湖南农业大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 载体构建 克隆方法 一步式混合胶回收
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 生物科学与技术
• 页码范围: 58-61
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.13331/j.cnki.jhau.2015.01.011

摘要

以构建原核表达载体重组质粒G4FPAGB1为例,介绍了一种新的载体构建方法.棉铃虫单核衣壳核多角体病毒G4毒株基因组上的Ha-FP-A片段用Hind Ⅲ和Eco RⅤ双酶切,Ha-FP-B片段用Xho Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切,绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)基因片段用Eco R Ⅴ和Xho Ⅰ双酶切,载体质粒pBluescript SK(+)用HindⅢ和Bam H Ⅰ双酶切.酶切产物经电泳检测后,将所有含目的片段的胶块切下,放在同一个离心管中进行DNA回收,得到的混合DNA产物直接加入连接酶进行连接、转化.结果表明,3个目的片段均成功连接到载体质粒上.本方法可高效、简单地构建包含多个目的片段的重组质粒.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘双清		83	261	9.0	13.0
2	黄国华		26	59	4.0	6.0
3	李顺姬		1	0	0.0	0.0
4	胡珏		1	0	0.0	0.0
5	成小文		1	0	0.0	0.0