高通量微流控荧光定量PCR激发光非均匀性研究

• 作者: 刘勇 朱灵 李志刚 王华东 王安 赵树弥
• 来源期刊: 量子电子学报
• 学科: 物理学
• 关键词: 医用光学与生物技术 均匀照明 光学设计 微流控芯片 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 激光应用
• 页码范围: 613-619
• 分类号: O439
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5461.2015.05.016

摘要

研究高通量微流控荧光定量聚合酶链反应(PCR)激发光非均匀性问题对提高DNA浓度定量结果的精度具有重要意义.根据荧光定量PCR的原理,分析了激发光非均匀性对循环阈值(Ct)测量精度的影响,给出了激发光非均匀性引起Ct值测量偏差的表达式,确定了激发光强度标准偏差应小于11.56％的要求.根据微流控芯片结构特点及激发光均匀性要求,设计了基于光棒的匀光光路用于解决激发光照度非均匀性问题.模拟及实验所得到的激发光照度的相对标准偏差分别为3.10％、6.01％,二者均小于11.56％.所设计匀光光路能够满足高通量微流控荧光定量PCR的要求.