CaMV 35S启动子在菊花中驱动GUS外源基因的表达分析

• 作者: 何深颖 孙静 宋爱萍 朱晓晨 王银杰 蒋甲福 阳淑金 陈发棣 高姣姣
• 来源期刊: 南京农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 菊花 转基因 35S启动子 GUS表达
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 554-559
• 分类号: S682.1+1
• 语种: 中文
• DOI: 10.7685/j.issn.1000-2030.2015.04.005

摘要

[目的]由于CaMV 35S启动子转化菊花存在外源基因表达量低、基因沉默等问题,本研究对35S启动子、2×35S启动子在菊花中驱动GUS外源基因的表达进行了分析,以期为高效菊花转化提供理论指导.[方法]通过设计引物,利用PCR从pCAMBIA1301 Vector中克隆了35S启动子、2×35S启动子的序列并插入pORE R2载体中,分别获得了重组载体pORER2-35S:GUS和pORE R2-2×35S:GUS,通过农杆菌介导法将构建的遗传转化载体分别导入切花菊品种‘神马’中.[结果]试验共转化2 296个菊花叶盘,经过筛选共得到16个过量表达的转基因株系.经PCR验证,目标片段已经成功插入转基因株系基因组.荧光定量PCR分析和染色分析显示,在转基因菊花中2×35S比35S启动子表现出驱动GUS基因高量表达的特性.[结论]在选择合适菊花品种的基础上,2×35S比35S启动子可以更加高效地促进基因表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈发棣	南京农业大学园艺学院	260	4491	34.0	49.0
2	孙静	南京农业大学园艺学院	11	27	3.0	5.0
3	宋爱萍	南京农业大学园艺学院	6	33	3.0	5.0
4	朱晓晨	南京农业大学园艺学院	2	8	2.0	2.0
5	阳淑金	南京农业大学园艺学院	3	8	2.0	2.0
6	何深颖	南京农业大学园艺学院	1	5	1.0	1.0
7	高姣姣	南京农业大学园艺学院	1	5	1.0	1.0
8	王银杰	南京农业大学园艺学院	1	5	1.0	1.0