PRMT5对肝癌细胞增殖及凋亡的影响

• 作者: 何俊波 张尤历 张行行 彭琬昕 徐岷 胡昌龙 葛璐 陆瑛 龚爱华
• 来源期刊: 中国细胞生物学学报
• 关键词: 蛋白质精氨酸甲基转移酶5(PRMT5) 肝癌 增殖 凋亡
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1639-1645
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11844/cjcb.2015.12.0301

摘要

该文目的为探讨蛋白质精氨酸甲基转移酶5(protein arginine methyltranserase 5,PRMT5)对肝癌细胞增殖、凋亡的影响.设计PRMT5短发夹核糖核酸(shRNA)序列,装入pLKO.1-TRC vector质粒,进行慢病毒包装,感染肝癌细胞SMMC-7721和BEL-7402,嘌呤霉素筛选并培养稳定低表达PRMT5细胞株.Western blot、qPCR检测shRNA干扰效率;CCK-8检测细胞增殖活性;平板克隆法检测细胞克隆形成能力;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测细胞增殖、凋亡相关蛋白的影响.结果显示,成功构建慢病毒重组质粒sh-PRMT5并感染肝癌细胞.Western blot、qPCR结果表明,筛选出的稳转细胞株能低表达PRMT5;在肝癌细胞中下调PRMT5的表达,可抑制细胞增殖(P＜0.05),降低cyclin Bl、cyclin D1、cdc20和cdc25B蛋白质水平(P＜0.05),降低细胞克隆形成能力(P＜0.05),促进细胞凋亡(P＜0.05),同时能诱导Caspase-3表达,降低Bcl-2/Bax的比值(P＜0.05).由此说明,下调PRMT5的表达能抑制肝癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,为进一步研究体内PRMT5的作用提供基础.