磁小体介导制备转基因猪模型

• 作者: 董婉维 郑志红 陈克研 陈振文
• 来源期刊: 实验动物与比较医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 猪 转基因 磁小体(BMP) 聚乙烯亚胺(PEI) 精子介导的基因转移
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 288-293
• 页数: 6页
• 分类号: Q95-33
• 字数: 3101字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2015.04.005

摘要

目的 以磁小体(BMP)和聚乙烯亚胺(PEI)为载体,通过睾丸注射精子介导法建立转基因猪模型.方法 将实验室保存的脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)绿色荧光蛋白(GFP)质粒与BMP和PEI混匀,制备BMP-PEI-PLA2-GFP混合物,采用睾丸多点注射法接种巴马小型猪,于接种后第2周、4周、6周至第20周采集精液,分别用RT-PCR和免疫荧光鉴定外源基因的表达情况;取阳性精液,对母猪实施人工授精;PCR及RT-PCR对所产仔猪进行鉴定.结果 精液中GFP基因于接种后第4周首现并持续至第16周;荧光显微镜检查可观察到GFP蛋白主要表达于精子顶体后区及精子尾颈部;经人工授精所产21头仔猪中,9头猪用PCR可检测GFP片段,用RT-PCR检测PLA2表达,该9头猪的表达量明显高于其它猪,总阳性率达42.86％.结论 BMP和PEI结合可作为良好的携带外源基因的非病毒性载体,用该载体通过精子介导法可以达到迅速制备转基因猪的目的,其成本低、方法简单、便捷.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董婉维	中国医科大学实验动物部	38	293	11.0	16.0
2	郑志红	中国医科大学实验动物部	57	222	8.0	13.0
3	陈振文	首都医科大学基础医学院实验动物学系	78	366	11.0	15.0
4	陈克研	中国医科大学实验动物部	18	8	2.0	2.0