瑞替普酶在乳酸乳球菌中的表达

• 作者: 何影影 倪萌 张同存 王重喜 罗学刚 马德云
• 来源期刊: 天津科技大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 瑞替普酶(rPA) Nuc 乳酸乳球菌 表达
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 【食品与生物技术】
• 页码范围: 19-24
• 页数: 6页
• 分类号: Q786
• 字数: 4126字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13364/j.issn.1672-6510.20140008

摘要

为建立溶栓药物瑞替普酶(rPA)的乳酸菌表达系统，从实验室前期构建的大肠杆菌表达质粒 pET22b-rpa 上扩增出目的基因 rpa，将该基因与乳酸菌表达质粒 pCYT 连接，构建了 pCYT-rpa 质粒．此外，为提高 rPA 在乳酸乳球菌NZ9000中的稳定性，同时构建了rpa位于葡萄球菌(Staphylococcal)耐热核酸酶基因nuc下游融合表达的重组质粒pCYT-nuc-rpa．将质粒pCYT-rpa和pCYT-nuc-rpa分别电转化至乳酸乳球菌NZ9000中，经Nisin诱导表达，Western blot结果显示Nuc可提高rPA在乳酸乳球菌中的稳定性，从而增加了rPA在乳酸菌中的表达量．重组rPA及Nuc-rPA在复性后均具有溶栓活性，活性分别为800,U/L和1,000,U/L．