聚乙烯亚胺－蛋白纳米复合体转染蛋白进入骨髓间充质干细胞的应用研究

• 作者: 余细勇 冯媛 吴岳恒 姜霖 李晓红 杨翔宇 潘宇 肖静
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 聚乙烯亚胺 骨髓间充质干细胞 蛋白质转染
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 论 著
• 页码范围: 1057-1063
• 页数: 7页
• 分类号: R363
• 字数: 5153字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2015.06.016

摘要

目的：探索纳米材料聚乙烯亚胺（ PEI ）携载不同分子量的蛋白质转染进人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）的作用及优化其最佳配比条件。方法：利用物理化学作用构建6组PEI－DNase I（DNA酶I）复合体，运用激光散射技术初步摸索其最佳摩尔比，用透射电镜直观复原纳米－蛋白复合体外貌；同时，原代分离培养健康人的骨髓间充质干细胞并进行体外扩增，通过构建成功的4组PEI－GFP（绿色荧光蛋白）纳米蛋白复合体对hBMSCs进行转染，共聚焦荧光显微镜下观察荧光表达情况，再通过MTT法检测该复合体对细胞增殖的毒性影响，并用β－半乳糖苷酶实验验证其转入蛋白的活性表现。结果：当PEI与蛋白质的摩尔比为4∶1时，形成的复合体转染效率最高，β－半乳糖苷酶实验细胞染色变蓝。结论：PEI能与蛋白质形成纳米复合体，并能转染多种蛋白质进入人骨髓间充质干细胞，所转染的蛋白质分子仍具有活性，为细胞重编程技术提供了新途径。