马铃薯WRKY2基因的克隆和非生物逆境下的表达模式

• 作者: 李立芹 王西瑶
• 来源期刊: 广西植物
• 学科: 生物学
• 关键词: 马铃薯 WRKY 系统发育 EMSA 表达模式
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 遗传与育种
• 页码范围: 401-407
• 页数: 7页
• 分类号: Q943.2|Q812
• 字数: 4529字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11931/guihaia.gxzw201309003

摘要

马铃薯 WRKY 2基因的功能尚未见有报道,WRKY 蛋白是近年来发现的一类重要转录因子家族,它们在植物应对生物胁迫、非生物胁迫和生长发育过程中起到关键的调控作用.该研究采用电子克隆法获得马铃薯 WRKY 2基因,该基因的编码区长度1065 bp,编码355氨基酸,序列分析表明,该蛋白属于 WRKY 家族第二组成员,锌指结构为 C-X5-C-X23 H-X-H.构建系统发育树结果表明它与番茄 WRKY7亲缘关系较近,氨基酸序列相似性达96％,与烟草中 WRKY 蛋白的相似性为86％,利用原核表达法在大肠杆菌中获得该蛋白.通过凝胶阻滞实验证明,该蛋白在体外能结合 W-box 元件,而且这种结合能被冷探针所竞争,同时也表明StWRKY2不能结合含有突变 W-box DNA 片段,证明 StWRKY2与 W-box 结合具有特异性.通过实时荧光定量 PCR 技术分析该基因在根、茎和叶中的表达量,结果表明该基因主要在根中表达,其次是叶和茎.为进一步研究该基因可能参与的生理功能,对马铃薯组培苗进行10μmol/L 低磷、10μmol/L 低钾、200 mmol/L NaCl、400 mmol/L PEG 溶液和4℃低温处理,处理时间6 h,实时荧光定量 PCR 的结果表明该基因在低磷处理后表达量明显下降,在200 mmol/L NaCl 和400 mmol/L PEG 处理6 h 后表达量明显升高,但在10μmol/L低钾和4℃低温处理后表达量与对照相比无明显变化.说明 StWRKY2能响应低磷、NaCl 和 PEG 这三种非生物逆境胁迫.研究结果可为进一步深入研究马铃薯 WRKY 2基因的功能奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李立芹	四川农业大学农学院	48	298	10.0	13.0
2	王西瑶	四川农业大学农学院	58	260	8.0	13.0