一种自制电极鸡胚视顶盖转基因技术

• 作者: 张必超 李小英 李晗 杨慈清 林俊堂 王聪睿
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 视顶盖 自制电极 活体电转 鸡胚
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 133-137
• 分类号: Q954.48
• 语种: 中文
• DOI: 10.16098/j.issn.0529-1356.2015.01.024

摘要

目的 建立一种高效鸡胚视顶盖电转基因技术,对自制电极进行评估.方法 在鸡胚发育的第5天(E5),将0.5 g/L的pCAGGS-绿色荧光蛋白(GFP)质粒0.25 ～ 0.5μl准确地注射到视顶盖内,每组60个鸡胚,在电压18V、每次脉冲60ms、间隔100ms、电脉冲6次的条件下,以原装电极为对照,自制电极为实验组进行定时定位活体电转基因,电转后在E6～E12时观察胚胎成活率,取材后在体视荧光显微镜下观察报告基因GFP表达结果以此判断转染的效率.结果 在鸡胚模型中,通过自制电极转染鸡胚视顶盖,24h后鸡胚成活率达到89％,在鸡胚发育到E12时存活率达到35％,与原装电极相比分别提高48.3％和600％个百分点.结论 自制电极在鸡胚视顶盖电转过程对胚胎的损伤小,转染后胚胎成活率高,为鸡胚视顶盖电转基因提供一种高效的转染技术.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王聪睿	新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室	25	98	6.0	8.0
2	李小英	新乡医学院生命科学技术学院	36	93	5.0	8.0
3	杨慈清	新乡医学院生命科学技术学院	39	83	6.0	6.0
7	李晗	新乡医学院生命科学技术学院	14	23	3.0	4.0
8	林俊堂	新乡医学院生命科学技术学院	61	101	5.0	6.0
12	张必超	新乡医学院生命科学技术学院	9	11	2.0	3.0