山定子(Malus baccata Borkh.)根系蛋白质提取及双向电泳技术体系的建立

• 作者: 吕德国 李丽杰 苏宏 马怀宇
• 来源期刊: 沈阳农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 山定子 根系 蛋白质 提取 双向电泳
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 532-537
• 页数: 6页
• 分类号: S661.1
• 字数: 4212字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1700.2015.05.004

摘要

为开展山定子(Malus baccata Borkh.)根系蛋白质组学研究,以当年生15片真叶的山定子实生苗白色幼嫩根系为试材,采用TCA-丙酮沉淀法、酚抽提法和Trizol抽提法3种方法提取其总蛋白质,并对样品上样量、IPG胶条的pH值范围和等电聚焦参数进行优化,建立适用于山定子根系的双向电泳技术体系.结果表明:采用Trizol抽提法提取的蛋白质产率最高,可达3.15mg·g-1 FW,且其SDS-PAGE图谱明显优于其他两种方法;选用800μg的上样量,17cm pH值4～7的IPG胶条和改进后的等电聚焦程序所得到的二维电泳图谱蛋白点最多,最清晰,分辨率最高.