番茄漆酶基因LeLACmiR397的克隆与表达分析

• 作者: 任怡然 庞明利 由春香 赵先炎 赵强 郝玉金
• 来源期刊: 园艺学报
• 学科: 农学
• 关键词: 番茄 漆酶 LAC 克隆 抗性
• 年，卷（期）: 2015,（7）
• 所属期刊栏目: 蔬菜
• 页码范围: 1285-1298
• 分类号: S641.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.16420/j.issn.0513-353x.2014-1079

摘要

通过BLAST分析,获得了番茄漆酶(Laccase,LAC)基因相关的15个EST片段,并对这些EST进行了同源比较和序列拼接,得到1个含有小分子RNA miR397识别位点的LAC片段,命名为LeACmiR397.根据蛋白质结构域推测,LeLACmiR397蛋白存在1个Cu-氧化酶结构域.LeLACmiR397时空表达分析表明,其在番茄根、花、成熟果实和愈伤组织中特异性表达,而在叶中不表达.根据该片段的核苷酸序列信息进行5'-和3'-RACE扩增,得到了番茄LAC基因的全长cDNA(LeLACiR397,登录号EU503151),其在番茄基因组中对应的基因为Solyc07g049460.2.1.通过在番茄中过表达miR397a基因,发现转基因番茄中LeLACmiR397表达量降低,同时其PPO、POD、SOD含量也有所下降.用丁香酸和芥子酸处理转基因植株幼苗,其根系比非转基因植株更长,抗性增强,表明LeLACmiR397与番茄植株的抗性反应有关.