沉默CD86树突状细胞在异种胰岛混合淋巴细胞培养中的作用研究

• 作者: 张肇达 李全生 田伯乐 苏安平
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 关键词: 树突状细胞 异种胰岛移植 CD80/CD86 免疫耐受 糖尿病
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 501-507
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨沉默CD86的树突状细胞(DC)在异种胰岛混合淋巴细胞培养中的作用.方法 分离培养BALB/c小鼠骨髓来源DC,流式细胞仪鉴定后,以CD86 siRNA转染DC.分离纯化SD大鼠胰岛,吖啶橙(AO)/碘化丙啶(PI)双荧光染色方法检测胰岛细胞活性;提取SD大鼠脾脏淋巴细胞,与经siRNA沉默CD86的DC混合培养,使DC负载SD大鼠抗原.在400胰岛当量SD大鼠胰岛细胞+1×106个BALB/c小鼠淋巴细胞(对照组1)基础上,混合普通DC(负载SD大鼠抗原)(对照组2)或siRNA沉默CD86的DC(负载SD大鼠抗原)(实验组)进行体外培养,另以单纯SD大鼠胰岛细胞为空白组,培养3d后倒置显微镜下检测细胞形态学变化,测定上清液中反映淋巴细胞增殖的细胞因子白介素(IL)-2、IL-4、IL-10及干扰素(IFN)-γ水平,AO/PI染色观察胰岛活性,并行葡萄糖刺激胰岛素释放实验,计算刺激指数.结果 培养所得的细胞具有典型的DC形态,流式细胞仪检测DC表面CD11c、CD80、CD86的表达阳性率分别为(86.26±9.73)％、(72.64±8.55)％、(77.18±10.23)％.CD86siRNA转染DC后CD86沉默.SD大鼠胰岛杂质较少,形态正常,细胞活性＞95％.混合细胞培养3d后,与对照组1、2比较,实验组的IL-10水平升高(P＜0.05),IL-4水平相当(P＞0.05),1L-2、IFN-γ均降低(P＜0.05),淋巴细胞增殖最少,胰岛功能最好,刺激指数最高.实验组4种细胞因子均高于空白组(P＜0.05),刺激指数低于空白组(P＜0.05).结论 沉默CD86的DC负载供体抗原后,与供体胰岛、受体淋巴细胞混合培养,可在一定程度上减轻免疫排斥反应,从而保护供体胰岛功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	田伯乐	四川大学华西医院胰腺外科	56	206	8.0	12.0
2	张肇达	四川大学华西医院胰腺外科	105	801	15.0	24.0
3	李全生	四川大学华西医院胆道外科	17	102	4.0	10.0
4	苏安平	四川大学华西医院甲状腺乳腺外科	16	16	2.0	4.0