小鼠生长激素(GH)shRNA可控表达载体构建及其基因沉默效率

• 作者: 于珊 李奎 白立景 赵如梦 鞠辉明
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 生长激素(GH) 可控表达 小发卡RNA(shRNA) 基因沉默
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 1611-1616
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2015.12.010

摘要

生长激素(growth hormone,GH)是由垂体分泌的一种促进动物机体生长、肌肉发育、调节代谢等重要生理功能的多肽激素.本研究根据小鼠(Mus musculus) GH mRNA序列设计1对mGH小发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)并构建了整合型可控表达mGH shRNA载体pSingle-tTS-mGH shRNA-RFP.重组载体转染小鼠垂体瘤AtT-20细胞,在培养液中添加诱导底物强力霉素(doxycyclin,DOX),借助荧光显微镜观察红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)的表达,利用实时荧光定量PCR(quantitative Realtime PCR,qRT-PCR)及Western blot检测细胞内mGH的表达变化.结果表明,经DOX诱导后,转染含GHshRNA重组载体细胞组GH mRNA相对表达水平比未经DOX诱导组及其他对照组细胞中降低70％左右,差异极显著(P＜0.01),GH蛋白也下降90％左右,其他各组间GH mRNA及蛋白表达量差异不显著(P＞0.05).本研究成功构建了可控表达GH shRNA载体,并在细胞水平证明有很好的可控基因沉默效率,后续配合可控过表达GH基因系统,通过控制GH基因表达水平研究其在生长发育及相关疾病发生中的机制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李奎	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	73	382	11.0	16.0
2	鞠辉明	扬州大学兽医学院	27	67	4.0	7.0
8	白立景	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	9	16	2.0	3.0
12	赵如梦	扬州大学兽医学院	1	5	1.0	1.0
13	于珊	扬州大学兽医学院	1	5	1.0	1.0