单管单轮多重PCR检测4种疟原虫混合血样

• 作者: 佘丹娅 卢丽丹 张念恒 黄天谊 黄雨婷
• 来源期刊: 中国寄生虫学与寄生虫病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 折叠引物 多重PCR 恶性疟原虫 疟疾诊断
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 200-205
• 分类号: R531.3
• 语种: 中文

摘要

目的 建立一种可同时检测4种疟原虫单一及混合感染的单管单轮多重PCR技术. 方法 在快速巢式PCR的基础上,设计折叠引物,优化PCR反应试剂的主要组分浓度及各条引物的退火温度,建立折叠引物多重PCR法(FP-PCR).利用优化后的FP-PCR法,对间日疟原虫(Plasmodium vivax)、恶性疟原虫(Pfalciparum)、卵形疟原虫(P.ovale,包括wallikeri亚种)和三日疟原虫(P.malariae)的单一及混合疟原虫DNA模板进行检测,分析该方法的敏感性和特异性. 结果 在7次重复实验中,4种疟原虫单一感染检出的最低浓度均接近1个/μl血.此外,在检测2～4种原虫以高、低密度相差100倍的模拟混合感染的滤纸血样中,FP-PCR法正确检出每个组合的所有虫种的成功率为68％ (57/84).在10份健康人滤纸血样中,FP-PCR法除产生少量二聚体外无任何扩增条带. 结论 FP-PCR法仅需单管单轮扩增即可同时检测4种人疟原虫单一或混合感染,为疟疾的监测和筛查提供了简便、可靠的诊断方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄雨婷		19	58	5.0	6.0
2	卢丽丹		34	122	7.0	8.0
3	黄天谊		8	52	5.0	7.0
4	佘丹娅		11	36	4.0	5.0
5	张念恒		27	96	6.0	8.0