高CYPs酶活性大鼠原代肝细胞模型的建立及其在药物肝毒性评价中的应用

• 作者: 何新 王丽莉 翟毅然 陈俊秀
• 来源期刊: 药物评价研究
• 学科: 医学
• 关键词: 药物性肝损伤(DILI) 高CYPs酶活性大鼠原代肝细胞模型 维拉帕米 CYPs酶代谢致毒
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 368-374
• 分类号: R965
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2015.04.005

摘要

目的 建立一种灵敏、快速的高细胞色素P450 (CYPs)酶活性的大鼠原代肝细胞模型,用于评价经CYPs酶代谢后产生肝毒性的药物.方法 分别采用苯巴比妥和β-萘黄酮两种CYPs酶广谱诱导剂构建大鼠原代肝细胞模型;应用“cocktail”探针底物法考察两种诱导剂对CYPs酶的影响;以基于CYPs酶代谢导致肝毒性的药物他克林(TAC)、双氯芬酸钠(DIC)和对乙酰氨基酚(PAR)为模型药物,评价所构建的高CYPs酶活性大鼠原代肝细胞模型与普通大鼠原代肝细胞间灵敏性的差异;应用所构建的高CYPs酶活性大鼠原代肝细胞模型评价维拉帕米(VER)的肝毒性.结果 与普通大鼠原代肝细胞相比,3种模型药物在高CYPs酶活性大鼠原代肝细胞中,在较低剂量时可使细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)、细胞中活性氧(ROS)水平升高,线粒体膜电位(MMP)水平下降,或相同剂量下得到更严重的损伤结果,CYPs酶抑制剂1-aminobenzotriazole (ABT)和metyrapone (MET)能抑制这3种损伤的发生;100μmol/L维拉帕米在普通大鼠原代肝细胞中并未引起LDH、ROS和MMP的改变,但在高CYPs活性大鼠原代肝细胞模型中,会引起细胞损伤,ABT和MET能抑制这种损伤.结论 经诱导建立的两种高CYPs酶活性大鼠原代肝细胞模型能更灵敏的评价基于CYPs酶代谢致毒药物的肝毒性;两种诱导剂诱导得到的高CYPs酶活性大鼠原代肝细胞模型对经不同CYPs酶亚型代谢的药物评价结果有各自优势.应用高CYPs酶活性大鼠原代肝细胞模型证实维拉帕米的致毒机制是经CYPs酶代谢产生肝毒性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王丽莉	天津中医药大学中药学院	18	25	3.0	4.0
3	何新	天津中医药大学中药学院	38	160	6.0	11.0
5	翟毅然	天津中医药大学中药学院	1	0	0.0	0.0
8	陈俊秀	天津中医药大学中药学院	2	2	1.0	1.0